Caracterización de las células madre mesenquimales caninas derivadas de tejido adiposo (CMM-TA) extraídas de dos sitios diferentes"- Evaluación del efecto de diferentes fuentes de extracción de tejido adiposo y pasajes celulares sobre la habilidad prolife

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UNIVERSIDAD DE LA REPÚBLICA FACULTAD DE VETERINARIA Programa de Posgrados CARACTERIZACIÓN DE LAS CÉLULAS MADRE MESENQUIMALES CANINAS DERIVADAS DE TEJIDO ADIPOSO (CMM-TA) EXTRAÍDAS DE DOS SITIOS ANATÓMICOS DIFERENTES Evaluación Del Efecto De Diferentes Fuentes De Extracción De Tejido Adiposo Y Pasajes Celulares Sobre La Habilidad Proliferativa, Inmunofenotipificación Y Multipotencialidad In Vitro De Las Células Madre Mesenquimales Caninas KEVIN MATÍAS YANESELLI GONZÁLEZ TESIS DE MAESTRÍA EN SALUD ANIMAL URUGUAY 2015 UNIVERSIDAD DE LA REPÚBLICA FACULTAD DE VETERINARIA Programa de Posgrados CARACTERIZACIÓN DE LAS CÉLULAS MADRE MESENQUIMALES CANINAS DERIVADAS DE TEJIDO ADIPOSO (CMM-TA) EXTRAÍDAS DE DOS SITIOS ANATÓMICOS DIFERENTES Evaluación Del Efecto De Diferentes Fuentes De Extracción De Tejido Adiposo Y Pasajes Celulares Sobre La Habilidad Proliferativa, Inmunofenotipificación Y Multipotencialidad In Vitro De Las Células Madre Mesenquimales Caninas KEVIN MATÍAS YANESELLI GONZÁLEZ _________________________ Dra. Jacqueline Maisonnave _________________________ Dra. Silvia Llambí _____________________________ Dra. Elizabeth Obino Cirne-Lima 2015 (Esta hoja se completará una vez se defienda la Tesis y se apruebe) INTEGRACIÓN DEL TRIBUNAL DE DEFENSA DE TESIS AÑO 2015 EN ESTA HOJA VA LA COPIA DEL ACTA DE DEFENSA DE TESIS En esta hoja va el Informe del Tribunal AGRADECIMIENTOS En el período de dos años he recorrido un lindo camino para realizar el presente trabajo. Tuve la fortuna de conocer muchas personas que me han acompañado en este largo y arduo recorrido para crecer académicamente y personalmente. En primer lugar agradezco a mi familia por el apoyo incondicional en este largo emprendimiento de ser un profesional universitario y ahora en mi perfeccionamiento de posgrado. Cuando en cumpleaños u otros eventos familiares me he tenido que ausentar por motivos de estudio, trabajo o intercambio en el exterior, siempre he recibido el apoyo incondicional de ellos, muchas gracias a mis padres y hermano. A mi co-orientadora profesora Dra. Elizabeth Cirne-Lima “Betty” por gentilmente recibirme en su laboratorio, integrarme a su grupo de trabajo y enseñarme muchas cosas a nivel profesional y personal. Con la amabilidad y hospitalidad que caracteriza a los brasileños. Además de estar profundamente agradecido con todo su equipo compuesto por Critiana Kuhl, Paula Terraciano, Fernanda de Oliveira, Sabrina Pizzato, Kamila Panzza, Alessandra Magrisso, Cristina Messias, Laura Ayres y el profesor Eduardo Pandolfi Passos por convivir el día a día de trabajo, ayudarme y aceptarme como su compañero y amigo. Rescato muchas cosas académicas de mi intercambio en el contexto de mi maestría pero más importante es la parte humana que dejo en mí. Agradezco a todas las personas que formaron parte de mi vida cuando estaba en Brasil, los cuales fueron un empujón anímico fundamental para seguir adelante. Estoy sumamente agradecido a los Drs. Uruguaysito Benavides y Rodrigo Puentes, siempre recibí el total apoyo para realizar parte de mi posgrado fuera del país, teniendo que cargar aún más sus ajustadas agendas para cubrir mi ausencia. Además de conformar un excelente grupo de trabajo en el Área Inmunología. A la profesora Dra. Silvia Llambí que como co-orientadora siempre me ha ayudado y dado excelentes consejos sobre mi investigación. Siempre dispuesta a colaborar y escuchar nuevas ideas para desarrollar. Y por último pero no menos importante, a mi orientador la profesora Dr. Jacqueline Masonnave. Ha sido la persona que me ha marcado el camino a recorrer desde el año 2008 como ayunante honorario y docente del Área Inmunología, orientadora de tesis de grado y maestría. En pocas palabras, ella me ha mostrado lo que es ser investigador, docente y un buen profesional. Además de inculcarme esa curiosidad por lo desconocido y a no tener miedo en ir “mar adentro” en la investigación para responder mis incógnitas. I Listado de Abreviaturas AND ADAS ADSC/ASC Ang-1 APC AT-MSC/A-MSC ATB ARNm BrdU-5 CFU-F CM CMA CME CMH CMH-CP CMH-LP CMM CMM-MO CMM-TA CMM-TA SC CMM-TA VS cpdl CU EDTA ES FACS FGF-2 FITC FVE HLA-g HSC ICAM IDO IL6 IL8 IL10 IGF-1 IRC iPS ISCT GVHD LL-37 MADS MCP-1 M2 DMEM MHCI MHCII MO MSC PCR PDGF PE Ácido desoxirribonucleico Adipose-derived adult stem cells Adipose derived stem cells Angiopoietin-1 Aloficocianina Adipose-tissue mesenchymal stem cells Antibiótico Ácido ribonucleico mensajero Bromo-2'-deoxy-uridine Colony forming units-fibroblastic Células madre Células madre adultas Células madre embrionarias Células madre hematopoyéticas Células madre hematopoyéticas a corto plazo Células madre hematopoyéticas a largo plazo Células madre mesenquimales Células madre mesenquimales derivadas de médula ósea Células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo Células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo extraídas de la región subcutánea Células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo extraídas de la región visceral Cumulative population doubling level Cordón umbilical Ethylenediaminetetraaceticacid Embryonic stem (ES) cells Fluorescence-activated cell sorting Fibroblast growth factor Isotiocianato de fluoresceína Fracción vascular estromal Human leukocyte antigen type g Hematopoietic stem cells Intercellular adhesion molecule indoleamine 2,3-dioxygenase Interleuquina 6 Interleuquina 8 Interleuquina 10 Insuline-like growth factor Insuficiencia Renal Crónica induced Pluripotent Stem (iPS) cells International Society of Cellular Therapy Graft-versus-host disease Catelicidina Multipotent adipose-derived stem cells Monocyte chemoattractant protein-1 Activación alternativa de macrófagos Dulbecco's Modified Eagle's Medium Major histocompatibility complex I Major histocompatibility complex II Médula ósea Mesenchymal stem cells-Multipotent mesenchymal stromal cellMesenchymal stem/stromal cells Polymerase Chain Reaction Platelet-derived growth factor Ficoeritrina II PLA PLGF SC SDF1 SFB TA TGF-β TLR TNFα UFC-B VCAM VEGF VS Vs Processed lipoaspirate cells Placental growth factor Subcutáneo Stromal cell-derived factor-1 suero fetal bovino Tejido adiposo Transforming growth factor beta Toll-like receptor Tumor necrosis factor alpha Unidades formadoras de colonia de bazo Vascular cell adhesion molecule Vascular endothelial growth factor Visceral Versus III Listado de Cuadros Cuadro I. Inmunofenotipificación de las CMM-TA SC y VS P4, P6 y P8 .24 Anexo I: Cuadro I. Habilidad proliferativa de las CMM-TA en P0 .53 Anexo II: Cuadro II. Habilidad proliferativa de las CMM-TA en P1- P3 .53 Anexo IV: Cuadro III: Porcentaje de diferenciación adipogénica .55 Anexo IV: Cuadro IV: Porcentaje de diferenciación condrogénica. . .55 Anexo IV: Cuadro V: Porcentaje de diferenciación osteogénica .55 IV Listado de Figuras Figura 1. Recuento de células viables del aislamiento de CMM-TA de las fuentes SC y VS .21 Figura 2. Imagen microscópica de las CMM-TA P2 (40 X): A fuente SC. B. fuente VS .21 Figura 3. Habilidad proliferativa de las CMM-TA SC y VS P0 22 Figura 4. Habilidad proliferativa de las CMM-TA SC y VS P1-P3 .22 Figura 5. Habilidad proliferativa de las CMM-TA SC y VS 23 Figura 6. Citometría de flujo: caracterización de las CMM-TA P3 de origen SC y VS .23 Figura 7. Tridiferenciación in vitro de CMM-TA P2 .25 Figura 8. Evaluación del efecto de altos pasajes sobre la proporción de diferenciación in vitro de las CMM-TA de ambas fuentes . .26 Figura 9. Comparación de la capacidad de síntesis de matriz ósea in vitro de las CMM-TA SC y VS P4 26 Figura 10. Comparación de la capacidad de síntesis de matriz ósea in vitro en diferentes pasajes (P4, P6 y P8) de las CMM-TA SC .27 Anexo IV: Figura 1. Citometría de flujo de las CMM-TA SC y VS P4, P6 y P8 .54 V INDICE Agradecimientos .I Listado de Abreviaturas . II Listado de Cuadros .IV Listado de Figuras .V RESUMEN . VIII SUMMARY . .IX 1. INTRODUCCIÓN . .1 1.1 Células madre (CM): origen y propiedades . . .1 1.1.1 Células madre totipotentes . .1 1.1.2 Células madre pluripotentes . . .2 1.1.3 Células madre multipotentes. . .5 1.2 Características de las células madre mesenquimales (CMM) . . .8 1.2.1 Nomenclatura de las CMM . . .8 1.2.2 Fuentes de extracción de las CMM . . .8 1.2.3 Características in vitro de las CMM . 9 1.3 Perspectivas del uso terapéutico de las CMM . 12 1.3.1 Principales usos terapéuticos en animales domésticos como modelo animal y/o paciente veterinario . .12 1.3.2 Iniciativa de “Una Salud” (One health) . 14 2. ANTECEDENTES ESPECÍFICOS . .15 2.1 Estructura del TA . .15 2.2 Fuentes de CMM-TA y sus características .16 3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y OBJETIVOS . .17 3.1 Hipótesis . . 17 3.2 Objetivo general . .17 3.3 Objetivos específicos . .17 4. ESTRATEGIA DE LA INVESTIGACIÓN . .17 5. MATERIALES Y MÉTODOS . .18 5.1 Animales . .18 5.2 Aislamiento y expansión de CMM-TA . .18 5.2.1 Extracción de TA . 18 5.2.2 Aislamiento de CMM-TA . .18 5.2.3 Cultivo de CMM-TA . .19 VI 5.3 Nivel de habilidad proliferativa celular . .19 5.4 Determinación de los antígenos de superficie celular 19 5.5 Tridiferenciación in vitro . 19 5.6 Cuantificación de matriz ósea in vitro . 20 5.7 Análisis estadístico . .20 6. RESULTADOS . .20 6.1 Aislamiento de CMM-TA . .20 6.2 Nivel de habilidad proliferativa celular .21 6.3 Determinación de los antígenos de superficie celular 23 6.4 Tridiferenciación in vitro . .24 6.5 Cuantificación de matriz ósea in vitro . 25 7. DISCUSIÓN . .27 8. CONCLUSIONES . .31 9. PERSPECTIVAS . .31 10. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS . .31 11. ANEXOS . .53 Anexo I: Cuadro I. Habilidad proliferativa de las CMM-TA en P0 .53 Anexo II: Cuadro II. Habilidad proliferativa de las CMM-TA en P1- P3 . .53 Anexo III: Figura 1. Citometría de flujo de las CMM-TA SC y VS P4, P6 y P8 . .54 Anexo IV: Tridiferenciación in vitro . 55 VII RESUMEN Las células madre mesenquimales (CMM) presentan características atractivas para su uso terapéutico, como multipotencialidad, inmunomodulación, angiogenicidad, migran al foco inflamatorio (homing) y antimicrobianas. Es importante profundizar sobre sus características in vitro para poder optimizar su potencial terapéutico en estudios preclínico (modelo animal) y en medicina veterinaria. El objetivo del presente trabajo fue evaluar las diferencias de las CMM caninas derivadas de tejido adiposo (TA) de las fuentes subcutánea (SC) y visceral (VS) en relación a su habilidad de proliferación, immunofenotipificación y multipotencialidad in vitro. Fue estudiada la habilidad de proliferación de CMM-TA SC y VS de caninos en bajos pasajes (P0-P3). Para caracterizar las CMM fueron inmunofenotipificadas y tridiferenciadas in vitro. Se evaluó la variación de la plasticidad de diferenciación in vitro, de la capacidad de sintetizar matriz ósea in vitro y de los marcadores antigénicos de superficie, en diferentes pasajes (P4, P6 y P8). En el P0 presentaron similar habilidad proliferativa en ambas fuentes de TA. En cambio, se observó una alta capacidad proliferativa de las CMM-TA SC en P1-P3 comparado con la fuente VS. Las CMM-TA de ambas fuentes presentaron los marcadores CD44+, CD90+ y no el CD45-. Fue posible tridiferenciar in vitro (adiposo, cartilaginoso y óseo) para ambos linajes. La CMM-TA SC preserva su multipotencialidad in vitro hasta el P8, en cambio la fuente VS hasta el P4. Además, la fuente SC presenta mayor capacidad de síntesis de matriz ósea in vitro. En conclusión, la fuente SC posee ventajas sobre la VS, debido a que las CMM-TA presentan mayor habilidad proliferativa, preservan su plasticidad in vitro mayor número de pasajes, tiene mayor capacidad de sintetizar matriz ósea in vitro y su extracción es menos invasiva. Describimos por primera vez un método alternativo para evaluar la habilidad proliferativa de las CMM-TA, determinando tiempo y cantidad final de células cosechadas. Nuevas investigaciones deberían ser abordadas para evaluar sí las diferencias in vitro se mantiene in vivo cuando son aplicadas las CMM-TA con fines terapéuticos. VIII SUMMARY Mesenchymal Stem Cells (MSC) have attractive characteristics for tissue regeneration, as multidifferentiation, immunomodulation, migration to the inflammatory niche (homing), angiogenesis and antimicrobial potential. It is important to continue studying in vitro characteristics, in order to improve therapeutic applications in preclinical studies (animal models) and veterinary medicine. The objective of this work was to evaluate the differences of the subcutaneous (Sc) and visceral (Vs) adipose-derived stem cells (ASC), in expression of surface markers and its ability to multidifferentiate and proliferate in vitro. In order to characterize the MSC they were immunophenotyped and in vitro tridifferentiated. The proliferation ability of Sc and Vs canine ASC in low passages (P0-P3) was studied. The differentiation plasticity, extracellular mineral deposits and the expression of canine MSC cell surface markers was also evaluated in different passages (P4, P6 y P8). ASC of both sources in P0 showed similar proliferative abilities. But Sc-ASC in P1-P3 showed a higher proliferative capacity than Vs. The ASC of both sources expressed surface markers CD44+ and CD90+ and did not CD45-. Both ASC sources differentiated into adipose, chondrogenic and bone tissues. Sc-ASC preserves its multipotentiality up to P8 and Vs only up to P4. Moreover, the ASC of Sc source have more advantages as they present a higher capacity of bone matrix synthesis in vitro, have a higher proliferative ability, conserves its plasticity during more passages and the collection procedures are less invasive. We describe for the first time an alternative method to evaluate the proliferative ability of the ASC, recording the time and number of harvested cells. New research is needed in order to evaluate if the ASC conserve the in vitro differences in vivo when therapeutically applied. IX 1. INTRODUCCIÓN 1.1 Células madre (CM): origen y propiedades A pesar de la diversidad de células que pueden ser reconocidas en el tejido adulto, todas derivan de una única célula-ovo resultante de la fecundación del óvulo por el espermatozoide. Esta célula tiene la capacidad de dar origen al embrión y finalmente al individuo adulto. En esta etapa la célula-ovo es denominada célula madre totipotente porque posee la plasticidad de generar un nuevo embrión y anexos embrionarios. Ella se multiplica para dar origen al embrión, para ello grupos celulares que van adquiriendo especialización, paulatinamente en este proceso van perdiendo la plasticidad de diferenciación (Zago, 2007). En el tejido adulto existen reservas de células con capacidad de multiplicarse, diferenciarse en el tejido de residencia. Estas son denominadas células madre adultas (CMA) responsables del mantenimiento de la integridad de los tejidos adultos, por la reparación o remodelación de los tejidos u órganos. Las CM se diferencian de otras células del organismo por presentar tres características: células indiferenciadas, capaces de multiplicarse por un período largo de tiempo manteniéndose indiferenciadas y capaces de diferenciarse en un tipo de célula especializada para un tejido en particular. Es decir, las CM son capaces presentar divisiones asimétricas, pudiendo dar origen a células indiferenciadas, reponiendo el pool de CM, o alternativamente pueden diferenciarse en células especializadas. Las CMA, pueden ser denominadas células madre somáticas (soma=cuerpo). Ellas tienen la capacidad limitada de diferenciarse, en general es restringida al tejido de origen, por lo general dan origen a un único o algunos tipos celulares diferenciados y son clasificadas como CMA unipotentes o multipotentes (Covas, 2007). Las CM pueden clasificarse de dos maneras: a) Según el tejido de origen que son extraídas pueden ser células madre embrionarias o adultas; b) Según su plasticidad de diferenciación son células totipotentes, pluripotentes, multipotentes y unipotentes. La primera clasificación se acopla los procesos biológicos de ontogénesis, y la plasticidad de las CM va disminuyendo gradualmente a la vez que un ser vivo avanza en etapas del desarrollo. Sin embargo, debido al desarrollo de nuevas técnicas moleculares que permiten la reprogramación celular, a partir de una célula adulta comprometida con un linaje puede ser “reseteada” y recobrar su estado de progenitora pluripotente. Estos grandes avances científicos indican que es conveniente clasificarlas por su grado de plasticidad, por eso es adoptada en el presente trabajo (Takahashi & Yamanaka 2006; Covas, 2007; Zago, 2007). 1.1.1 Células madre totipotentes Después de la fertilización de los gametos óvulo-espermatozoide, ocurre la generación de una célula-ovo que va a dar origen a toda la diversidad de y valores sociales en otros. Así el orientador deberá tener en cuenta los siguientes valores: 78 ¾ Respeto a la autonomía de las personas ¾ Respeto a las diferencias individuales y sociales ¾ Confianza en el potencial de crecimiento y desarrollo individual ¾ Autoconciencia de la influencia de los prejuicios ¾ Interés y actitud crítica hacia los cambios socioeconómicos del entorno ¾ Aperturismo delante de las nuevas ideas y costumbres ¾ Aprendizaje continuo y desarrollo personal Citado por: Jersild, ArtriurThomas, (1986) La Personalidad del Maestro. Barcelona, México: Páidos 91 En lo que se refiere al perfil social, teóricos de la orientación establecen que ante la complejidad del mundo social y educativo, sugieren una serie de habilidades, capacidades y actitudes que el orientador deberá desarrollar en torno a:79 ¾ Desarrollar el trabajo de manera autónoma, responsable, creativa y con disponibilidad ¾ Capacidad de adaptación al cambio ¾ Con sintonía con la cultura de la institución y hacia los demás ¾ Trato amable y afable hacia los compañeros y hacia los alumnos ¾ Espíritu de colaboración ¾ Estrategias de diálogo ¾ Estrategias de negociación Es importante rescatar que las propuestas didácticas para la toma de decisiones vocacionales mostradas convergen de manera sobresaliente en cuanto a los aspectos motivacionales y actitudinales, además de los cognitivos que intervienen en todo el proceso de la toma de decisiones. Se puede resaltar el perfil del orientador como ayudante y colaborador del alumno en la tarea de clarificación de valores y de elección de carrera profesional, lo que ha de servir a los estudiantes como entrenamiento y aprendizaje incluso, para la vida adulta. Otro aspecto es la formación del orientador la cual implica un largo y complejo proceso que va más allá de la obtención del título universitario. El orientador no debe quedar al margen de los avances teóricos y prácticos de su ámbito y es necesario que diseñe su propio plan de formación continua de acuerdo con su propio proyecto profesional y de las necesidades de la institución en donde presta sus servicios 79 Rimada, Belarmino, (1993) Manual de Orientación Universitaria: Guía del docente. México: Trillas 92 4.4 CARACTERÍSTICAS DE LOS PROGRAMAS DE TRANSICIÓN Referirme al término transición puede poco más o menos resultar relativo a cambio o transformación, pero es necesario puntualizar, porque el tema es que los programas de orientación vocacional sean congruentes con la realidad, esto es, que el concepto de transición incluye los cambios naturales que tienen lugar en la vida y cambios más sutiles, no tan naturales o esperados, por lo que la transición es el abandono de un conjunto de asunciones previas y la adopción de otro conjunto nuevo que le permita afrontar un espacio. Schlossberg (1984)80 contribuye con sus aportes a la comprensión de los mecanismos de ayuda para transitary presenta los siguientes tipos de transición: ¾ Transición académica: se enfoca a que la labor orientadora se concretará en promover aptitudes y destrezas que faciliten las actitudes de cambio, es decir, el paso de una escuela a otra o de un nivel escolar a otro. ¾ Transición a la realidad laboral: es la preparación para la inserción laboral en donde habrá que analizar conjuntamente con la persona que transita la adecuación de sus itinerarios formativos con la elección profesional y el análisis de destrezas necesarias para cada profesión u ocupación. Por eso, se tienen que crear programas de conexión entre la escuela y el mundo empresarial. Estas dos instancias han de estar conectadas para facilitar la implantación de programas de paso de una a otra. ¾ Transición intralaboral: en donde la persona, a mitad de su carrera, se suele plantear nuevos objetivos y metas profesionales, lo cual comporta crisis transitorias. Momentos de paso desde un trabajo a otro, desde una ocupación a otra. ¾ Transiciones vitales: son las transiciones como las de paso de la vida activa a la jubilación, las emigraciones laborales de una región a otra, etcétera. Por otra parte, como sustento de la estructuración de los programas de transición, existen principios básicos que con respecto a la interacción entre escuela y trabajo, la 38 93 a. Conferencia Internacional de Educación, celebrada en Ginebra en 1981, en su recomendación No. 73, establece las siguientes:81 ¾ Ha de haber una interacción entre la educación y el trabajo productivo. ¾ Las relaciones entre la educación y el trabajo se deben dar a todos los niveles y modalidades de la educación, procurando que la teoría y la práctica se relacionen entre sí y que se valore la significación del trabajo en el marco de los valores de la sociedad. ¾ Hay que tomar una serie de medidas para incluir en los planes de estudio y curricula disposiciones que favorezcan las actividades creadoras y productivas dentro y fuera de la escuela. ¾ Puede haber dos vías principales para conectar escuela y trabajo: introducir el trabajo productivo en el proceso de aprendizaje y escolar y, facilitar a la población activa la posibilidad de continuar su educación sin interrumpir la labor productiva. ¾ Las actividades relacionadas con la vida laboral deben ser igualmente accesibles a las personas de ambos sexos. Una vez que hemos revisado el concepto de transición y sus principios básicos para considerar en la elaboración de los programas de transición vamos a abordar las características deseables en su planificación, tomando en cuenta dos aspectos: 1. El público al que se dirige el programa de la asignatura de Orientación Vocacional en la escuela preparatoria No. 2 de la U.A.E.H. transita por la 80 Citado por: Rodríguez, M. L. (1998) La Orientación Profesional, Ariel: Barcelona, p. 149 a UNESCO: OIE, (1982) 38 . Conferencia Internacional de Educación, Ginebra, 1981, Recomendación No. 73. www.oie.org Consulta: Junio. 2004 81 94 etapa de la adolescencia, un período de crisis, de cambio o transformación (dimensión personal) 2. La actualidad condicionada por la realidad social y laboral (dimensión situacional) Las características que deberá contener la planificación de los programas de orientación vocacional son:82 a. La orientación para la transición debe incluirse en el programa escolar o académico, toda vez que en el diseño curricular se pueden introducir materias relacionadas directamente con la profesionalidad y vocacionalización (el presente estudio cuenta con ésta característica ya que está incluida la asignatura de Orientación Vocacional en la curricula del bachillerato de la U.A.E.H.) b. Los objetivos curriculares deberían adaptarse a las necesidades laborales concretas postescolares. c. La orientación profesional y la formación profesional deben contemplar objetivos a corte y mediano plazo que dinamicen los vínculos escuela- empresa, escuela-comunidad local y escuela-organismos orientadores. d. Las modificaciones curriculares deben experimentarse previamente en proyectos piloto que contengan no sólo las bases de formación del alumnado, sino también del profesorado y directivos de los centros, y de la familia y de ¡a comunidad. 82 Instituto Hidalguense de Educación Media Superior y Superior, U.A.E.H. Fundamento Curricular, Publicación Interna 95 e. De estos proyectos piloto deben surgir materiales, estrategias y procedimientos didácticos que superen la fase de información profesional y se adentren en lo que se podría denominar destrezas para la educación vital-profesional de los jóvenes. 4.4.1 ELABORACIÓN DE PROGRAMAS La elaboración de los programas de estudio, en las instituciones públicas del Estado, se ha desarrollado en torno a considerar el currículo, en una forma integral, y a buscar formas concretas de instrumentación del mismo. ¿Qué es un programa de estudios? Es una formulación hipotética de los aprendizajes que se pretende lograr en una unidad didáctica de las que componen el Plan de Estudios, documento éste que marca, las líneas generales que orientan la formulación de los programas de las unidades que lo componen.83 Es importante mencionar que algunas de las propuestas para elaboración de programas están orientadas más a la elaboración técnica de objetivos de aprendizaje que a la consideración de la forma en que este programa destaca las características del curso, las nociones básicas que desarrollarán las relaciones que guarda ésta materia con los problemas concretos que ayuda a resolver. Otros criterios son los de continuidad, secuencia e integración que deben estipularse tanto en la relación del programa con el plan de estudios como dentro del programa mismo, cuando se decide el orden de las unidades temáticas que lo componen. 83 Pansza, G. M. y Pérez, E. C. (1986) Operatividad de la Didáctica, Vol. II., En: "Elaboración de Programas", México: Gernika 96 Por otra parte, contar con el diagnóstico de los conocimientos y habilidades que tienen los alumnos es importante para elaborar un programa de social PARTICIPACIÓN SOCIAL Familia y amigos Escuela y trabajo Sociedad Gobierno Votaciones Marchas Con todo Con nada Total Cantidad Porcentaje 6 6 6 6 5 5 4 2 40 15% 15% 15% 15% 12.5% 12.5% 10% 5% 100% Cuadro 25 Democracia DEMOCRACIA Escuela Con todo Gobierno Sociedad Votaciones Con nada Total Cantidad 7 6 7 6 10 4 40 Porcentaje 17.5% 15% 17.50% 15% 25% 10% 100% ANEXOS 117 ANEXOS 118 ANEXOS 119 ANEXOS 120 ANEXOS 121 ANEXOS 122 ANEXOS 123 ANEXOS 124 ANEXOS 125 ANEXOS 126 ANEXOS 127 ANEXOS 128 129 BIBLIOGRAFÍA BARBA, Bonifacio (1994), La nueva lev general de Educación, Fondo de cultura Económica, México. (1998) Educación para los derechos humanos, Fondo de cultura Económica, México. ________ BAUDELOT y ESTABLET (1975), La escuela capitalista, Siglo XXI, Buenos Aires, Argentina. BOURDIEU, Pierre y Jean-Claude Passeron (1996), La Reproducción, Elementos para una teoría del sistema de enseñanza, Distribuciones Fontamara S. A., México. Buxarrais, María Rosa y Miquel Martínez (coords.) (1996), Educación en valores y desarrollo moral, Instituto de Ciencias de la Educación, Universidad de Barcelona y Organización de Estados Iberoamericanos, Barcelona. CONDE Silvia e Ismael Vidales (2000), Formación Cívica y Ética 1, 2 y3, Larousse, México. COMIE, (1981), I CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN EDUCATIVA, Consejo Mexicano de Investigación Educativa (COMIE), México. __________________ (1993), II CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN E DUCATIVA , Consejo Mexicano de Investigación Educativa (COMIE), México. __________________ (1995), III CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN EDUCATIVA , Consejo Mexicano de Investigación Educativa (COMIE), México. (1997), IV CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN E DUCATIVA, Consejo Mexicano de Investigación Educativa (COMIE), México. __________________ __________________ (1999), Consejo V CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN E DUCATIVA , Mexicano de Investigación Educativa (COMIE), México. BIBLIOGRAFIAS 130 (2001), VI C ONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN E DUCATIVA , Consejo Mexicano de Investigación Educativa (COMIE), México. _________________ (2003), Vil CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN E DUCATIVA, Consejo Mexicano de Investigación Educativa (COMIE), México. _________________ CORTINA , Adela (2001), Ciudadanos del mundo. Hacia una teoría de la ciudadanía, Alianza, España. ______________ (2001 Anaya a ) Ética aplicada y democracia radical, Tecnos Grupo S.A., Madrid, España. CUELI , José (1992), Valores y metas de la educación mexicana, Ediciones de la Jornada - SEP, México. DE LA MORA , José Guadalupe (1990), Esencia de la filosofía de la Educación, Progreso, México. DÍAZ, Carlos (2001), Educar en Valores, Trillas, México. DÍAZ, Elias (1998), Estado de Derecho y Sociedad Democrática, Taurus, Alfaguara, México. FERRATER, JOSÉ (1975), DICCIONARIO DE FILOSOFÍA, BUENOS AIRES, SUDAMERICANA . FINKEL, Sara (1977), El capital humano. Concepto Ideológico, Nueva Imagen, México. FRONDIZI, Risiere (2000), ¿Qué son los valores?, Fondo de Cultura Económica, México. GARCÍA CANCLINI, Néstor (1984), "Cultura y organización popular", en: Cuadernos Políticos, núm. 39, ene-mar, ERA, México. BIBLIOGRAFIAS 131 (1995) Culturas Híbridas: Estrategias para entrar y salir de la modernidad, Grijalbo, México. ___________ ___________ (1995-a) Consumidores y ciudadanos: Conflictos multiculturales de la Globalización, Grijalbo, México GRASS, Juan (2000), La Educación en Valores y Virtudes en la Escuela: Teoría y Práctica, Trillas, México. GUERRERO, Sanjuanita (1998). Desarrollo de Valores, Castillo, México. HARGREAVES , Andy (1999), Profesorado, cultura y posmodernidad (cambias los tiempos, cambia el profesorado), Morata, Madrid. HIRSCH, Ana (compiladora) (2001), Educación y Valores, Guernika, México. HIRSCH , Ana, Armando Alcántara, Germán Gómez, Alma Herrera, Guadalupe Ibarra, Maribel Ríos e Isabel Royo (2003), "Investigaciones de valores universitarios y profesionales" en: BERTELY María (2003), Educación Derechos Sociales y Equidad, Tomo III, COMIE, México. HIRSCH, Ana y Margarita de Jesús Quezada (2003), "Educación y valores de los mexicanos" en: BERTELY María (2003), Educación Derechos Sociales y Equidad, Tomo III, COMIE, México HOUSE, Ernest (2000), Evaluación, ética y poder, Morata, Madrid, España. KOHLBERG, Lawrence (1992), Psicología del Desarrollo Moral, Desclée de Brower, Bilbao. LATAPÍ, Pablo (1999), La moral regresa a la Escuela, Universidad Nacional Autónoma de México, Centro de Estudios sobre la Universidad, Plaza y Valdés, México. ___________ (1999), Un siglo de educación en México, Consejo Nacional para la cultura y las Artes-Fondo de Cultura Económica, México. BIBLIOGRAFIAS 132 ________ (2003), El debate sobre los valores en la escuela Mexicana, Fondo de Cultura Económica, México. LLAÑEZ, Rafael (2001), Cómo enseñar y transmitir los valores, Trillas, México. MAGGI, Rolando, María Guadalupe Alonso, Ismael Vidales y Osear Walker (2003), "Investigaciones sobre la formación y el desarrollo moral en la escuela" en: BERTELY María (2003), Educación Derechos Sociales y Equidad, Tomo III, COMIE, México. MENESES, Ernesto (1983, 1986), TENDENCIAS EDUCATIVAS OFICIALES EN MÉXICO, VOL. I, 1821-1911; VOL. II, 1911-1934, VOL. I, PORRUA ; VOL. II, CENTRO DE ESTUDIOS EDUCATIVOS, MÉXICO. MOLINA , Amelia (2000), Estudio etnográfico sobre formación de valores para la democracia en el sexto grado de primaria en ocho escuelas de la ciudad de México y su área metropolitana , Tesis de maestría, Universidad Iberoamericana, México. MOLINA , Amelia y Guadalupe Alonso (1999), Formación de valores en primaria, educar para la democracia "Mejoremos nuestra convivencia en la escuela: Documento Base, SEP-OEA, México. MONTOVANI , Juan (1962), Educación y plenitud humana , Hispanoamérica, México. MUÑOZ IZQUIERDO, Carlos (1996), Origen y consecuencias de las desigualdades educativas, Centro de Estudios Educativos, México. MUÑOZ BATISTA , Jorge (1982), El estudio de los valores en Educación, Red de Información Educativa, México. PEREIRA , María Nieves (2001), Educación en Valores, Trillas, México. PÉREZ GÓMEZ, A. I. (2000), La cultura escolar en sociedad neoliberal. Morata, Madrid, España. BIBLIOGRAFIAS 133 POOT, Elo ísa, Amelia Molina, Alicia Cabrera y Gerardo Hurtado (1999), Guía para la elaboración de programas de asignatura, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, (mimeo). RATHS , Louis, Harmin Merril, Simón Sidney (1967), El sentido de los valores y la enseñanza, Me. Graw Hill, México. RODRÍGUEZ, Mauro (1992), Los valores, clave de la excelencia, Me. Graw Hill, México. Russi, Bernado (1998), "Grupos de discusión: de la investigación social a la investigación reflexiva", en: Galindo Jesús (coord.), Técnicas de investigación en sociedad, cultura y comunicación, Pearson Addison Wesly Longman, México. SARRAMONA , Jaume (1993), Como entender y aplicar la democracia en la escuela, CEAC, Barcelona, España. SAVATER, Fernando (1997), El valor de educar, Ariel, México. ___________________ (1988), Ética como amor propio, Consejo Nacional para la Cultura y las Artes-Mondadori, México. SCHMELKES , Sylvia (1997), La escuela y la formación valoral, Castellanos, México. SEP (1973), Lev Federal de Educación, México. ____ (1999), Lev General de Educación, México. ______ (1999a), Planes y programas de educación básica: Primaria, México. BIBLIOGRAFIAS ______ (1999b), 134 Planes y programas de educación básica: Secundaria, México. SEP (2001), Libro para el maestro: Formación C ívica y Ética, México. ________ (2001), PROGRAMA NACIONAL DE EDUCACIÓN 2001-2006, MÉXICO. ___________ (2004), P ROGRAMA INTEGRAL DE EDUCACIÓN MEDIA SUPERIOR, MÉXICO. FORTALECIMIENTO INSTITUCIONAL DE SOLANA , Fernando (1999), Educación en el siglo XXI, Colección Reflexi ón y Análisis, México. __________________ (2000), Educar /.para qué?, Limusa, México. TAPIA , Medardo, Leticia Barba, Aurora Elizondo y Ana Corina Fernández (2003), "Formación cívica en México: 1990-2001" en: BERTELY María (2003), Educación Derechos Sociales y Eguidad, Tomo III, COMIE, México. VASCONI, Tomás (1977), Aportes para una teoría de la educación, Nueva Imagen, México. V ILLALPANDO , José (1996), El mundo de lo s valores, Escuela Nacional de Pedagogía, México. WUEST, Teresa (1997), "La formación ético-valorativa en la formación docente inicial", en: Pensamiento Universitario, UNAM, Coordinaci ón de Humanidades, Centro de Estudios sobre la Universidad, México. YUREN, María Teresa (1995), Eticidad, valores sociales y educación, Universidad Pedagógica Nacional, México. BIBLIOGRAFIAS 135 YUREN, María Teresa, Bonifacio Barba, César Barona, Isabel Izquierdo, Amelia Molina y Laura Osornio (2003), "El trabajo filosófico y conceptual en educación valoral y formación sociomoral. Una contribución al estado del conocimiento en México (1991-2001)" en: BERTELY María (2003), Educación Derechos Sociales y Equidad, Tomo III, COMIE, México.

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